分子分析的方法和技巧?(大连夜店排名?)

中亿财经网 gengxing 2023-10-04 23:00:12

1. 分子分析的方法和技巧?

诊断是指应用分子生物学方法检测患者体内遗传物质的结构或表达水平的变化而做出诊断的技术。分子诊断是预测诊断的主要方法,既可以进行个体遗传病的诊断,也可以进行产前诊断。分子诊断主要是指编码与疾病相关的各种结构蛋白、酶、抗原抗体、免疫活性分子基因的检测。j6z中亿财经网财经门户

一、分子诊断的标本采集j6z中亿财经网财经门户

合理的标本采集对保证标本的完整性和核酸的定性/定量检测的准确性是至关重要的。标本应严格按照适当的生物安全指南进行采集,不合适的标本处理会导致核酸降解,产生错误的患者检测结果。j6z中亿财经网财经门户

1. 标本识别j6z中亿财经网财经门户

标本采集时应明确患者身份及其标本,充分尊重患者隐私。同时应为医疗人员提供合理而充足的检测和治疗相关的信息。标本应牢固地贴上标签,内容至少包括:识别号、采集日期和时间、标本采集者姓名、标本来源等。j6z中亿财经网财经门户

2. 申请单信息j6z中亿财经网财经门户

申请单至少包括以下几点信息:唯一标识号、入院登记号、患者姓名、出生日期、性别、种族、采集日期、标本类型、相关的临床和实验室信息、医生姓名、标本采集的部门、检测申请原因等。j6z中亿财经网财经门户

3. 标本采集j6z中亿财经网财经门户

采集人体组织或体液标本时应遵守相关的安全防范措施,佩戴手套,预防标本中血源性病原体的传播,同时阻止标本被处理人员的脱落细胞污染。特定的检测方法可能需要额外的预防措施和采集说明,如HPV检测采集宫颈标本应在醋酸试验之前。实验室采用不同的检测方法时应考虑潜在的干扰和污染来源,正确指导和培训临床医生按照特定方法或检测体系的标本采集要求进行采集。临床实验室收到标本后应尽快将标本信息输入至实验室信息系统(LIS),同时应尽快处理接收的标本。如果标本存在如溶血、冰冻血液或标记不当等情况应考虑拒收。j6z中亿财经网财经门户

4. 抗凝剂j6z中亿财经网财经门户

血液和骨髓穿刺(BMA)标本采集应使用合适的抗凝管或含其他添加剂的试管。试管添加剂的选择应根据分析物类型、试验、标本量而定,有研究表明肝素和亚铁血红素可能会抑制PCR反应。因此,推荐使用EDTA和ACD抗凝剂检测血浆或骨髓穿刺标本。如果被测量为细胞内RNA,采集血液或骨髓的设备应包含RNA稳定剂,或者在采集后立即加入RNA稳定溶液。j6z中亿财经网财经门户

5. 组织标本j6z中亿财经网财经门户

如果无法获得血液或口腔黏膜细胞(如患者死亡),或者组织标本的基因型同血液或口腔黏膜细胞不同,或者组织为某些潜在感染物质核酸的唯一来源时,可采用组织标本。通常最佳的组织量为1-2g,但由于各种组织所含的DNA和RNA的量不同,采集组织的量也因组织而异。多细胞组织如骨髓、淋巴结、脾适用于基因组DNA检测,需要的组织量较少。少细胞标本如肌肉、纤维、脂肪组织不是基因组DNA的最佳来源,采集量最好大于1-2g。通常,如果没有广泛脂肪浸润,大于10mg的组织至少获得10μg的RNA或DNA。不同组织的蛋白质的量和类型各不相同,核酸分离方法也因组织而异。按照特定来源的组织,根据厂家建议分离DNA或RNA。j6z中亿财经网财经门户

病理科医生通常从大块组织中采取有代表性的部分组织进行固定、染色、显微镜检测和病理诊断,或者选择有代表性的组织提取DNA或RNA进行分子学分析。一般选择病灶组织进行检测、非病灶组织作为对照。对照组织对某些分子检测是至关重要的,如杂合性缺失分析或微卫星不稳定性试验。j6z中亿财经网财经门户

二、分子诊断的技术种类j6z中亿财经网财经门户

分子诊断是当代医学发展的重要前沿领域之一,其核心技术是基因诊断,常规技术包括:j6z中亿财经网财经门户

(1)聚合酶链式反应(PCR);j6z中亿财经网财经门户

(2)DNA测序(DNA sequencing);j6z中亿财经网财经门户

(3)荧光原位杂交技术(FISH);j6z中亿财经网财经门户

(4)DNA印迹技术( DNA blotting );j6z中亿财经网财经门户

(5)单核苷酸多态性(SNP);j6z中亿财经网财经门户

(6)连接酶链反应(LCR);j6z中亿财经网财经门户

(7)基因芯片技术(gene chip)。j6z中亿财经网财经门户

三、分子诊断应用领域j6z中亿财经网财经门户

其中,PCR产品占据目前分子诊断的主要市场,基因芯片是分子诊断市场发展的主要趋势。PCR产品灵敏度高、特异性强、诊断窗口期短,可进行定性、定量检测,可广泛用于肝炎、性病、肺感染性疾病、优生优育、遗传病基因、肿瘤等,填补了早期免疫检测窗口期的检测空白,为早期诊断、早期治疗、安全用血提供了有效的帮助。基因芯片是分子生物学、微电子、计算机等多学科结合的结晶,综合了多种现代高精尖技术,被专家誉为诊断行业的终极产品。但其成本高、开发难度大,目前产品种类很少,只用于科研和药物筛选等用途。j6z中亿财经网财经门户

四、分子诊断基本原理j6z中亿财经网财经门户

分子诊断的主要技术有核酸分子杂交、聚合酶链反应和生物芯片技术。j6z中亿财经网财经门户

1. 核酸分子杂交技术j6z中亿财经网财经门户

具有一定互补序列和核苷酸单链在液相或固相中按碱基互补配对原则缔合成异质双链的过程,称为核酸分子杂交。杂交的双方是待测核酸序列和探针序列。应用该技术可对特定DNA或RNA序列进行定性或定量检测。j6z中亿财经网财经门户

2.聚合酶链反应(即Polymerase chain reaction,PCR)j6z中亿财经网财经门户

原理:PCR是模板DNA,引物和四种脱氧核糖核烯三磷酸(dNTP)在DNA聚合酶作用下发生酶促聚合反应,扩增出所需目的DNA。包括三个基本步骤:双链DNA模板加热变性成单链(变性);在低温下引物与单链DNA互补配对(退火);在适宜温度下TapDNA聚合酶催化引物沿着模板DNA延伸。j6z中亿财经网财经门户

3.等温扩增技术j6z中亿财经网财经门户

恒温扩增技术的基本原理和反应成分各不相同,但本质上要解决的核心难题是使新合成的DNA模板在恒定的温度下退火变性进而引发进一步的扩增反应,这使得恒温扩增技术具备检测快速、价格低廉等优势,而在及时现场检测(point of care)市场中脱颖而出。主要技术有LAMP、NEAR、RPA、ERA等。j6z中亿财经网财经门户

3.生物芯片技术是近年发展起来的分子生物学与微电子技术相结合的核酸分析检测技术。最初的生物芯片技术主要目标是用于DNA序列测定、基因表达谱鉴定和基因突变体检测和分析,所以又称为DNA芯片或基因芯片技术。由于目前这一技术已扩展至免疫反应、受体结合等非核酸领域,出现了蛋白质芯片、免疫芯片、细胞芯片、组织芯片等,所以改称生物芯片技术更符合发展趋势。j6z中亿财经网财经门户

五、分子诊断基本流程j6z中亿财经网财经门户

多年来,大部分分子诊断实验室的核心技术都主要集中在检测特异性、相对较短的DNA或RNA片段上。该技术能诊断传染性疾病、鉴别影响药物代谢的特殊基因变异型或检测与疾病有关的基因,如与癌症有关的基因。这些检测的核心是实时定量聚合酶链反应(PCR)、转录调节扩增(TMA)、靶向扩增和信号扩增等类似技术的应用。桑格排序和DNA片段分析或采用毛细电泳法的凝胶法都是分子诊断实验室的关键技术,但他们通常还包括检测过程中的扩增步骤。为了能顺利应用那些采用DNA和RNA来诊断疾病的检测,分子诊断实验室必须要使用定义明确的工作流程,从而得到稳定的、有效的结果,而当前已存在能帮助诊断实验室实现每个工作流程流水化的特殊工具。检测的基本流程如下所示:j6z中亿财经网财经门户

1、样本收集和制备。 从样本中提取出用于检测的基因。j6z中亿财经网财经门户

2、扩增: 一旦分离出基因物质,必须立即将其扩增到可检测数量,以便做出诊断命令。j6z中亿财经网财经门户

3、检测: 获得足够的目标物质后,光型传感器将读取与即将检测的目标物质相对应的信号。信号必须是单一的或多样的,从而实现在一次反应(如多通道检测)中检测到多种目标物质。j6z中亿财经网财经门户

4、数据分析: 对在检测步骤中读取出的信号进行分析。将分析结果转换为实验室人员随时可以解释的信息,从而最终为临床医生提供诊断结果。j6z中亿财经网财经门户

六、分子诊断发展趋势j6z中亿财经网财经门户

世界各国高度重视分子诊断技术的发展,基因芯片将成为新一代分子诊断试剂开发的主流。基因芯片是分子生物学、微电子、计算机等多学科结合的结晶,综合了多种现代高精尖技术,被专家誉为"诊断行业的终极产品"。基因芯片具有同时能够检测多个靶点的功能,具有快速有效的特点。因而基因芯片成为新一代分子诊断试剂的主要开发方向,但其成本高、开发难度大,目前产品种类很少,只用于科研和药物筛选等用途。目前基因芯片的大规模临床应用还存在尚未克服的技术缺陷,主要是由于芯片诊断特异性和灵敏度低、芯片诊断成本高昂和芯片诊断配套仪器价格昂贵等原因。j6z中亿财经网财经门户

目前全球,虽然只有少数的芯片可用于临床诊断,但国内基因芯片技术已经处于世界领跑的地位。基因芯片技术将是荧光定量PCR 检测技术最具挑战的潜在对手,主要是:荧光定量PCR 技术一次只能检测一个或几个目标基因,而基因芯片技术可以实现对大量目标基因的同时检测。随着人类基因组计划的进展,基因芯片在国内外已成为研发热点。若基因芯片技术迅速成熟并大规模产业化,将对荧光定量PCR 检测产生较大的冲击。不过,目前基因芯片的大规模临床应用还存在尚未克服的技术缺陷,主要是由于芯片诊断特异性和灵敏度低、芯片诊断成本高昂和芯片诊断配套仪器价格昂贵等原因,预计荧光定量PCR 检测技术在今后5 到10 年内可保持领先。j6z中亿财经网财经门户

2. 大连夜店排名?

TT酒吧j6z中亿财经网财经门户

Tall Toys Night Club,大连人气最火爆的夜店之一,这里有闪耀的灯光系统,超豪华的舞池,颜值超高的专业MC、DJ。酒吧消费者以年轻人为主,大部分都是大连本地高校的大学生,气氛很嗨,服务很贴心。TT招牌是网红dj,比如dj宪等,是一家很适合蹦迪的酒吧。酒吧位于独立街19号远大大厦1楼,人均273元。j6z中亿财经网财经门户

奥斯卡酒吧j6z中亿财经网财经门户

Dr.oscar奥斯卡酒吧,是知名娱乐集团诺亚方舟旗下酒吧品牌,首家规模宏大的剧院式酒吧。高科技的声光电控制和别具匠心的舞台创意设计,带来颠覆性的都市夜生活体验。大连奥斯卡酒吧位于港湾街20A名仕财富1层,人均消费281元。作为剧院式酒吧典范,它以独特创新颠覆娱乐产业。自诞生以来秉承创造一流娱乐品牌的极致匠心,将“玩乐、震撼、神秘、时尚”的娱乐理念发挥到极致。j6z中亿财经网财经门户

苏荷酒吧j6z中亿财经网财经门户

苏荷酒吧是全国具原创和个性的连锁酒吧品牌,独特舒服的空间设计,极具魅力的音乐,亲切真诚的服务,构筑了苏荷独有的模式。大连苏荷酒吧位于长江路59号,人均消费173元。酒吧环境复古范,会邀请欧美乐队及歌手表演,是一家既可以欣赏演出,又可以与DJ嗨到飞起的音乐酒吧。j6z中亿财经网财经门户

PLAY HOUSE酒吧j6z中亿财经网财经门户

作为世界级夜店,PLAYHOUSE知名酒吧连锁品牌更注重演出的层次多元,品种多样,与其合作的都是在国际上都极富盛名的演艺机构。酒吧由国内顶级视觉团队设置布阵,使用世界顶级声光电硬件设备,打造后现代重工业与娱乐相结合的艺术品。酒吧位于民生街120号,人均消费180元。j6z中亿财经网财经门户

极地酒吧j6z中亿财经网财经门户

极地酒吧是大连知名老牌酒吧,没有门票和低消,是大连大学生和年轻人的交友胜地。酒吧分两层,三楼是以听歌为主的鸡尾酒小酒吧,有乐队歌手表演,四楼是国际DJ时尚音乐俱乐部,以蹦迪为主,气氛很嗨,不过周末才开放。酒吧位于大连西岗区民主广场16号,人均160元。j6z中亿财经网财经门户

艾丽丝酒吧j6z中亿财经网财经门户

大连艾丽丝俱乐部酒吧属于演艺吧模式,创立于1999年,由当初的50平方米的小酒吧发展到3000多平方米的CLUB,酒吧分三层,一楼为欧美风格的演艺酒吧,二楼、三楼为豪华KTV。艾丽丝每月都会举行一次盛大的主题派对,每晚有歌舞表演,拥有众多外籍客人,在国际上具有一定的知名度和美誉度。酒吧位于长江路51号经典生活小区B区12号楼,人均消费192元。j6z中亿财经网财经门户

VIVA Barj6z中亿财经网财经门户

VIVA Bar是大连知名清吧,提供经典鸡尾酒和单一麦芽威士忌等品类丰富的酒品,位于星海广场C3区33号君悦酒店47层,人均消费161元。酒吧可以欣赏到窗外270度无遮挡海景和霓虹闪烁的跨海大桥,并以星海湾璀璨夜景为依托,打造光影系统,引入环境融入式LED配合舞台效果,音乐由外籍资深DJ的现场演绎,使宾客可以全身心沉浸在酒吧光影环境中。j6z中亿财经网财经门户

胡桃里音乐酒馆j6z中亿财经网财经门户

胡桃里是合纵文化集团旗下连锁酒吧品牌,定位酒吧/餐厅/咖啡馆的文艺融合模式,将美食、美酒、音乐、表演融为一体,是比酒吧更具文化氛围的夜生活新地标。大连胡桃里位于长江路271号佳兆业广场北门,人均消费130元。胡桃里这个名字取自于胡桃色的暗雅而不守旧,文艺又不乏时尚的特性,设计装饰上充满了幽静与新奇,营造城市里的绿野仙踪。j6z中亿财经网财经门户

拉培耶小镇j6z中亿财经网财经门户

OX BAR 拉培耶小镇,大连知名清吧,拥有高超技艺的专业调酒师,推荐僵尸酒、椰林飘香、威士忌酸、精酿啤酒,位于友好广场昆明街27号昆明街与向前街交叉口附近,人均消费130元。酒吧是古老的英式装修风格,配有颇有年代木头桌椅,晶莹剔透的进口杯具,高级的音响设备,适合静坐小酌,是享受静谧时刻的绝佳之选。j6z中亿财经网财经门户

in lounge隐酒廊j6z中亿财经网财经门户

in lounge隐酒廊,店如其名般大隐隐于市,是一家很有特色的鸡尾酒吧。酒吧有两层,一层在热狗店里面,需要如同密室逃脱一般找到密码才能进入,当然找不到也可以按门铃,推开门就能看到琳琅满目的酒摆满了整片墙面,号称是大连最值钱的酒墙,这里鸡尾酒好喝又好看,调酒师还可以私人订制。酒吧位于吉庆街4号日航酒店后,人均消费100元。j6z中亿财经网财经门户

3. 大连夜店排名?

TT酒吧j6z中亿财经网财经门户

Tall Toys Night Club,大连人气最火爆的夜店之一,这里有闪耀的灯光系统,超豪华的舞池,颜值超高的专业MC、DJ。酒吧消费者以年轻人为主,大部分都是大连本地高校的大学生,气氛很嗨,服务很贴心。TT招牌是网红dj,比如dj宪等,是一家很适合蹦迪的酒吧。酒吧位于独立街19号远大大厦1楼,人均273元。j6z中亿财经网财经门户

奥斯卡酒吧j6z中亿财经网财经门户

Dr.oscar奥斯卡酒吧,是知名娱乐集团诺亚方舟旗下酒吧品牌,首家规模宏大的剧院式酒吧。高科技的声光电控制和别具匠心的舞台创意设计,带来颠覆性的都市夜生活体验。大连奥斯卡酒吧位于港湾街20A名仕财富1层,人均消费281元。作为剧院式酒吧典范,它以独特创新颠覆娱乐产业。自诞生以来秉承创造一流娱乐品牌的极致匠心,将“玩乐、震撼、神秘、时尚”的娱乐理念发挥到极致。j6z中亿财经网财经门户

苏荷酒吧j6z中亿财经网财经门户

苏荷酒吧是全国具原创和个性的连锁酒吧品牌,独特舒服的空间设计,极具魅力的音乐,亲切真诚的服务,构筑了苏荷独有的模式。大连苏荷酒吧位于长江路59号,人均消费173元。酒吧环境复古范,会邀请欧美乐队及歌手表演,是一家既可以欣赏演出,又可以与DJ嗨到飞起的音乐酒吧。j6z中亿财经网财经门户

PLAY HOUSE酒吧j6z中亿财经网财经门户

作为世界级夜店,PLAYHOUSE知名酒吧连锁品牌更注重演出的层次多元,品种多样,与其合作的都是在国际上都极富盛名的演艺机构。酒吧由国内顶级视觉团队设置布阵,使用世界顶级声光电硬件设备,打造后现代重工业与娱乐相结合的艺术品。酒吧位于民生街120号,人均消费180元。j6z中亿财经网财经门户

极地酒吧j6z中亿财经网财经门户

极地酒吧是大连知名老牌酒吧,没有门票和低消,是大连大学生和年轻人的交友胜地。酒吧分两层,三楼是以听歌为主的鸡尾酒小酒吧,有乐队歌手表演,四楼是国际DJ时尚音乐俱乐部,以蹦迪为主,气氛很嗨,不过周末才开放。酒吧位于大连西岗区民主广场16号,人均160元。j6z中亿财经网财经门户

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大连艾丽丝俱乐部酒吧属于演艺吧模式,创立于1999年,由当初的50平方米的小酒吧发展到3000多平方米的CLUB,酒吧分三层,一楼为欧美风格的演艺酒吧,二楼、三楼为豪华KTV。艾丽丝每月都会举行一次盛大的主题派对,每晚有歌舞表演,拥有众多外籍客人,在国际上具有一定的知名度和美誉度。酒吧位于长江路51号经典生活小区B区12号楼,人均消费192元。j6z中亿财经网财经门户

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VIVA Bar是大连知名清吧,提供经典鸡尾酒和单一麦芽威士忌等品类丰富的酒品,位于星海广场C3区33号君悦酒店47层,人均消费161元。酒吧可以欣赏到窗外270度无遮挡海景和霓虹闪烁的跨海大桥,并以星海湾璀璨夜景为依托,打造光影系统,引入环境融入式LED配合舞台效果,音乐由外籍资深DJ的现场演绎,使宾客可以全身心沉浸在酒吧光影环境中。j6z中亿财经网财经门户

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胡桃里是合纵文化集团旗下连锁酒吧品牌,定位酒吧/餐厅/咖啡馆的文艺融合模式,将美食、美酒、音乐、表演融为一体,是比酒吧更具文化氛围的夜生活新地标。大连胡桃里位于长江路271号佳兆业广场北门,人均消费130元。胡桃里这个名字取自于胡桃色的暗雅而不守旧,文艺又不乏时尚的特性,设计装饰上充满了幽静与新奇,营造城市里的绿野仙踪。j6z中亿财经网财经门户

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OX BAR 拉培耶小镇,大连知名清吧,拥有高超技艺的专业调酒师,推荐僵尸酒、椰林飘香、威士忌酸、精酿啤酒,位于友好广场昆明街27号昆明街与向前街交叉口附近,人均消费130元。酒吧是古老的英式装修风格,配有颇有年代木头桌椅,晶莹剔透的进口杯具,高级的音响设备,适合静坐小酌,是享受静谧时刻的绝佳之选。j6z中亿财经网财经门户

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in lounge隐酒廊,店如其名般大隐隐于市,是一家很有特色的鸡尾酒吧。酒吧有两层,一层在热狗店里面,需要如同密室逃脱一般找到密码才能进入,当然找不到也可以按门铃,推开门就能看到琳琅满目的酒摆满了整片墙面,号称是大连最值钱的酒墙,这里鸡尾酒好喝又好看,调酒师还可以私人订制。酒吧位于吉庆街4号日航酒店后,人均消费100元。j6z中亿财经网财经门户

4. 分子分析的方法和技巧?

诊断是指应用分子生物学方法检测患者体内遗传物质的结构或表达水平的变化而做出诊断的技术。分子诊断是预测诊断的主要方法,既可以进行个体遗传病的诊断,也可以进行产前诊断。分子诊断主要是指编码与疾病相关的各种结构蛋白、酶、抗原抗体、免疫活性分子基因的检测。j6z中亿财经网财经门户

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合理的标本采集对保证标本的完整性和核酸的定性/定量检测的准确性是至关重要的。标本应严格按照适当的生物安全指南进行采集,不合适的标本处理会导致核酸降解,产生错误的患者检测结果。j6z中亿财经网财经门户

1. 标本识别j6z中亿财经网财经门户

标本采集时应明确患者身份及其标本,充分尊重患者隐私。同时应为医疗人员提供合理而充足的检测和治疗相关的信息。标本应牢固地贴上标签,内容至少包括:识别号、采集日期和时间、标本采集者姓名、标本来源等。j6z中亿财经网财经门户

2. 申请单信息j6z中亿财经网财经门户

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3. 标本采集j6z中亿财经网财经门户

采集人体组织或体液标本时应遵守相关的安全防范措施,佩戴手套,预防标本中血源性病原体的传播,同时阻止标本被处理人员的脱落细胞污染。特定的检测方法可能需要额外的预防措施和采集说明,如HPV检测采集宫颈标本应在醋酸试验之前。实验室采用不同的检测方法时应考虑潜在的干扰和污染来源,正确指导和培训临床医生按照特定方法或检测体系的标本采集要求进行采集。临床实验室收到标本后应尽快将标本信息输入至实验室信息系统(LIS),同时应尽快处理接收的标本。如果标本存在如溶血、冰冻血液或标记不当等情况应考虑拒收。j6z中亿财经网财经门户

4. 抗凝剂j6z中亿财经网财经门户

血液和骨髓穿刺(BMA)标本采集应使用合适的抗凝管或含其他添加剂的试管。试管添加剂的选择应根据分析物类型、试验、标本量而定,有研究表明肝素和亚铁血红素可能会抑制PCR反应。因此,推荐使用EDTA和ACD抗凝剂检测血浆或骨髓穿刺标本。如果被测量为细胞内RNA,采集血液或骨髓的设备应包含RNA稳定剂,或者在采集后立即加入RNA稳定溶液。j6z中亿财经网财经门户

5. 组织标本j6z中亿财经网财经门户

如果无法获得血液或口腔黏膜细胞(如患者死亡),或者组织标本的基因型同血液或口腔黏膜细胞不同,或者组织为某些潜在感染物质核酸的唯一来源时,可采用组织标本。通常最佳的组织量为1-2g,但由于各种组织所含的DNA和RNA的量不同,采集组织的量也因组织而异。多细胞组织如骨髓、淋巴结、脾适用于基因组DNA检测,需要的组织量较少。少细胞标本如肌肉、纤维、脂肪组织不是基因组DNA的最佳来源,采集量最好大于1-2g。通常,如果没有广泛脂肪浸润,大于10mg的组织至少获得10μg的RNA或DNA。不同组织的蛋白质的量和类型各不相同,核酸分离方法也因组织而异。按照特定来源的组织,根据厂家建议分离DNA或RNA。j6z中亿财经网财经门户

病理科医生通常从大块组织中采取有代表性的部分组织进行固定、染色、显微镜检测和病理诊断,或者选择有代表性的组织提取DNA或RNA进行分子学分析。一般选择病灶组织进行检测、非病灶组织作为对照。对照组织对某些分子检测是至关重要的,如杂合性缺失分析或微卫星不稳定性试验。j6z中亿财经网财经门户

二、分子诊断的技术种类j6z中亿财经网财经门户

分子诊断是当代医学发展的重要前沿领域之一,其核心技术是基因诊断,常规技术包括:j6z中亿财经网财经门户

(1)聚合酶链式反应(PCR);j6z中亿财经网财经门户

(2)DNA测序(DNA sequencing);j6z中亿财经网财经门户

(3)荧光原位杂交技术(FISH);j6z中亿财经网财经门户

(4)DNA印迹技术( DNA blotting );j6z中亿财经网财经门户

(5)单核苷酸多态性(SNP);j6z中亿财经网财经门户

(6)连接酶链反应(LCR);j6z中亿财经网财经门户

(7)基因芯片技术(gene chip)。j6z中亿财经网财经门户

三、分子诊断应用领域j6z中亿财经网财经门户

其中,PCR产品占据目前分子诊断的主要市场,基因芯片是分子诊断市场发展的主要趋势。PCR产品灵敏度高、特异性强、诊断窗口期短,可进行定性、定量检测,可广泛用于肝炎、性病、肺感染性疾病、优生优育、遗传病基因、肿瘤等,填补了早期免疫检测窗口期的检测空白,为早期诊断、早期治疗、安全用血提供了有效的帮助。基因芯片是分子生物学、微电子、计算机等多学科结合的结晶,综合了多种现代高精尖技术,被专家誉为诊断行业的终极产品。但其成本高、开发难度大,目前产品种类很少,只用于科研和药物筛选等用途。j6z中亿财经网财经门户

四、分子诊断基本原理j6z中亿财经网财经门户

分子诊断的主要技术有核酸分子杂交、聚合酶链反应和生物芯片技术。j6z中亿财经网财经门户

1. 核酸分子杂交技术j6z中亿财经网财经门户

具有一定互补序列和核苷酸单链在液相或固相中按碱基互补配对原则缔合成异质双链的过程,称为核酸分子杂交。杂交的双方是待测核酸序列和探针序列。应用该技术可对特定DNA或RNA序列进行定性或定量检测。j6z中亿财经网财经门户

2.聚合酶链反应(即Polymerase chain reaction,PCR)j6z中亿财经网财经门户

原理:PCR是模板DNA,引物和四种脱氧核糖核烯三磷酸(dNTP)在DNA聚合酶作用下发生酶促聚合反应,扩增出所需目的DNA。包括三个基本步骤:双链DNA模板加热变性成单链(变性);在低温下引物与单链DNA互补配对(退火);在适宜温度下TapDNA聚合酶催化引物沿着模板DNA延伸。j6z中亿财经网财经门户

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恒温扩增技术的基本原理和反应成分各不相同,但本质上要解决的核心难题是使新合成的DNA模板在恒定的温度下退火变性进而引发进一步的扩增反应,这使得恒温扩增技术具备检测快速、价格低廉等优势,而在及时现场检测(point of care)市场中脱颖而出。主要技术有LAMP、NEAR、RPA、ERA等。j6z中亿财经网财经门户

3.生物芯片技术是近年发展起来的分子生物学与微电子技术相结合的核酸分析检测技术。最初的生物芯片技术主要目标是用于DNA序列测定、基因表达谱鉴定和基因突变体检测和分析,所以又称为DNA芯片或基因芯片技术。由于目前这一技术已扩展至免疫反应、受体结合等非核酸领域,出现了蛋白质芯片、免疫芯片、细胞芯片、组织芯片等,所以改称生物芯片技术更符合发展趋势。j6z中亿财经网财经门户

五、分子诊断基本流程j6z中亿财经网财经门户

多年来,大部分分子诊断实验室的核心技术都主要集中在检测特异性、相对较短的DNA或RNA片段上。该技术能诊断传染性疾病、鉴别影响药物代谢的特殊基因变异型或检测与疾病有关的基因,如与癌症有关的基因。这些检测的核心是实时定量聚合酶链反应(PCR)、转录调节扩增(TMA)、靶向扩增和信号扩增等类似技术的应用。桑格排序和DNA片段分析或采用毛细电泳法的凝胶法都是分子诊断实验室的关键技术,但他们通常还包括检测过程中的扩增步骤。为了能顺利应用那些采用DNA和RNA来诊断疾病的检测,分子诊断实验室必须要使用定义明确的工作流程,从而得到稳定的、有效的结果,而当前已存在能帮助诊断实验室实现每个工作流程流水化的特殊工具。检测的基本流程如下所示:j6z中亿财经网财经门户

1、样本收集和制备。 从样本中提取出用于检测的基因。j6z中亿财经网财经门户

2、扩增: 一旦分离出基因物质,必须立即将其扩增到可检测数量,以便做出诊断命令。j6z中亿财经网财经门户

3、检测: 获得足够的目标物质后,光型传感器将读取与即将检测的目标物质相对应的信号。信号必须是单一的或多样的,从而实现在一次反应(如多通道检测)中检测到多种目标物质。j6z中亿财经网财经门户

4、数据分析: 对在检测步骤中读取出的信号进行分析。将分析结果转换为实验室人员随时可以解释的信息,从而最终为临床医生提供诊断结果。j6z中亿财经网财经门户

六、分子诊断发展趋势j6z中亿财经网财经门户

世界各国高度重视分子诊断技术的发展,基因芯片将成为新一代分子诊断试剂开发的主流。基因芯片是分子生物学、微电子、计算机等多学科结合的结晶,综合了多种现代高精尖技术,被专家誉为"诊断行业的终极产品"。基因芯片具有同时能够检测多个靶点的功能,具有快速有效的特点。因而基因芯片成为新一代分子诊断试剂的主要开发方向,但其成本高、开发难度大,目前产品种类很少,只用于科研和药物筛选等用途。目前基因芯片的大规模临床应用还存在尚未克服的技术缺陷,主要是由于芯片诊断特异性和灵敏度低、芯片诊断成本高昂和芯片诊断配套仪器价格昂贵等原因。j6z中亿财经网财经门户

目前全球,虽然只有少数的芯片可用于临床诊断,但国内基因芯片技术已经处于世界领跑的地位。基因芯片技术将是荧光定量PCR 检测技术最具挑战的潜在对手,主要是:荧光定量PCR 技术一次只能检测一个或几个目标基因,而基因芯片技术可以实现对大量目标基因的同时检测。随着人类基因组计划的进展,基因芯片在国内外已成为研发热点。若基因芯片技术迅速成熟并大规模产业化,将对荧光定量PCR 检测产生较大的冲击。不过,目前基因芯片的大规模临床应用还存在尚未克服的技术缺陷,主要是由于芯片诊断特异性和灵敏度低、芯片诊断成本高昂和芯片诊断配套仪器价格昂贵等原因,预计荧光定量PCR 检测技术在今后5 到10 年内可保持领先。j6z中亿财经网财经门户

5. 分子分析的方法和技巧?

诊断是指应用分子生物学方法检测患者体内遗传物质的结构或表达水平的变化而做出诊断的技术。分子诊断是预测诊断的主要方法,既可以进行个体遗传病的诊断,也可以进行产前诊断。分子诊断主要是指编码与疾病相关的各种结构蛋白、酶、抗原抗体、免疫活性分子基因的检测。j6z中亿财经网财经门户

一、分子诊断的标本采集j6z中亿财经网财经门户

合理的标本采集对保证标本的完整性和核酸的定性/定量检测的准确性是至关重要的。标本应严格按照适当的生物安全指南进行采集,不合适的标本处理会导致核酸降解,产生错误的患者检测结果。j6z中亿财经网财经门户

1. 标本识别j6z中亿财经网财经门户

标本采集时应明确患者身份及其标本,充分尊重患者隐私。同时应为医疗人员提供合理而充足的检测和治疗相关的信息。标本应牢固地贴上标签,内容至少包括:识别号、采集日期和时间、标本采集者姓名、标本来源等。j6z中亿财经网财经门户

2. 申请单信息j6z中亿财经网财经门户

申请单至少包括以下几点信息:唯一标识号、入院登记号、患者姓名、出生日期、性别、种族、采集日期、标本类型、相关的临床和实验室信息、医生姓名、标本采集的部门、检测申请原因等。j6z中亿财经网财经门户

3. 标本采集j6z中亿财经网财经门户

采集人体组织或体液标本时应遵守相关的安全防范措施,佩戴手套,预防标本中血源性病原体的传播,同时阻止标本被处理人员的脱落细胞污染。特定的检测方法可能需要额外的预防措施和采集说明,如HPV检测采集宫颈标本应在醋酸试验之前。实验室采用不同的检测方法时应考虑潜在的干扰和污染来源,正确指导和培训临床医生按照特定方法或检测体系的标本采集要求进行采集。临床实验室收到标本后应尽快将标本信息输入至实验室信息系统(LIS),同时应尽快处理接收的标本。如果标本存在如溶血、冰冻血液或标记不当等情况应考虑拒收。j6z中亿财经网财经门户

4. 抗凝剂j6z中亿财经网财经门户

血液和骨髓穿刺(BMA)标本采集应使用合适的抗凝管或含其他添加剂的试管。试管添加剂的选择应根据分析物类型、试验、标本量而定,有研究表明肝素和亚铁血红素可能会抑制PCR反应。因此,推荐使用EDTA和ACD抗凝剂检测血浆或骨髓穿刺标本。如果被测量为细胞内RNA,采集血液或骨髓的设备应包含RNA稳定剂,或者在采集后立即加入RNA稳定溶液。j6z中亿财经网财经门户

5. 组织标本j6z中亿财经网财经门户

如果无法获得血液或口腔黏膜细胞(如患者死亡),或者组织标本的基因型同血液或口腔黏膜细胞不同,或者组织为某些潜在感染物质核酸的唯一来源时,可采用组织标本。通常最佳的组织量为1-2g,但由于各种组织所含的DNA和RNA的量不同,采集组织的量也因组织而异。多细胞组织如骨髓、淋巴结、脾适用于基因组DNA检测,需要的组织量较少。少细胞标本如肌肉、纤维、脂肪组织不是基因组DNA的最佳来源,采集量最好大于1-2g。通常,如果没有广泛脂肪浸润,大于10mg的组织至少获得10μg的RNA或DNA。不同组织的蛋白质的量和类型各不相同,核酸分离方法也因组织而异。按照特定来源的组织,根据厂家建议分离DNA或RNA。j6z中亿财经网财经门户

病理科医生通常从大块组织中采取有代表性的部分组织进行固定、染色、显微镜检测和病理诊断,或者选择有代表性的组织提取DNA或RNA进行分子学分析。一般选择病灶组织进行检测、非病灶组织作为对照。对照组织对某些分子检测是至关重要的,如杂合性缺失分析或微卫星不稳定性试验。j6z中亿财经网财经门户

二、分子诊断的技术种类j6z中亿财经网财经门户

分子诊断是当代医学发展的重要前沿领域之一,其核心技术是基因诊断,常规技术包括:j6z中亿财经网财经门户

(1)聚合酶链式反应(PCR);j6z中亿财经网财经门户

(2)DNA测序(DNA sequencing);j6z中亿财经网财经门户

(3)荧光原位杂交技术(FISH);j6z中亿财经网财经门户

(4)DNA印迹技术( DNA blotting );j6z中亿财经网财经门户

(5)单核苷酸多态性(SNP);j6z中亿财经网财经门户

(6)连接酶链反应(LCR);j6z中亿财经网财经门户

(7)基因芯片技术(gene chip)。j6z中亿财经网财经门户

三、分子诊断应用领域j6z中亿财经网财经门户

其中,PCR产品占据目前分子诊断的主要市场,基因芯片是分子诊断市场发展的主要趋势。PCR产品灵敏度高、特异性强、诊断窗口期短,可进行定性、定量检测,可广泛用于肝炎、性病、肺感染性疾病、优生优育、遗传病基因、肿瘤等,填补了早期免疫检测窗口期的检测空白,为早期诊断、早期治疗、安全用血提供了有效的帮助。基因芯片是分子生物学、微电子、计算机等多学科结合的结晶,综合了多种现代高精尖技术,被专家誉为诊断行业的终极产品。但其成本高、开发难度大,目前产品种类很少,只用于科研和药物筛选等用途。j6z中亿财经网财经门户

四、分子诊断基本原理j6z中亿财经网财经门户

分子诊断的主要技术有核酸分子杂交、聚合酶链反应和生物芯片技术。j6z中亿财经网财经门户

1. 核酸分子杂交技术j6z中亿财经网财经门户

具有一定互补序列和核苷酸单链在液相或固相中按碱基互补配对原则缔合成异质双链的过程,称为核酸分子杂交。杂交的双方是待测核酸序列和探针序列。应用该技术可对特定DNA或RNA序列进行定性或定量检测。j6z中亿财经网财经门户

2.聚合酶链反应(即Polymerase chain reaction,PCR)j6z中亿财经网财经门户

原理:PCR是模板DNA,引物和四种脱氧核糖核烯三磷酸(dNTP)在DNA聚合酶作用下发生酶促聚合反应,扩增出所需目的DNA。包括三个基本步骤:双链DNA模板加热变性成单链(变性);在低温下引物与单链DNA互补配对(退火);在适宜温度下TapDNA聚合酶催化引物沿着模板DNA延伸。j6z中亿财经网财经门户

3.等温扩增技术j6z中亿财经网财经门户

恒温扩增技术的基本原理和反应成分各不相同,但本质上要解决的核心难题是使新合成的DNA模板在恒定的温度下退火变性进而引发进一步的扩增反应,这使得恒温扩增技术具备检测快速、价格低廉等优势,而在及时现场检测(point of care)市场中脱颖而出。主要技术有LAMP、NEAR、RPA、ERA等。j6z中亿财经网财经门户

3.生物芯片技术是近年发展起来的分子生物学与微电子技术相结合的核酸分析检测技术。最初的生物芯片技术主要目标是用于DNA序列测定、基因表达谱鉴定和基因突变体检测和分析,所以又称为DNA芯片或基因芯片技术。由于目前这一技术已扩展至免疫反应、受体结合等非核酸领域,出现了蛋白质芯片、免疫芯片、细胞芯片、组织芯片等,所以改称生物芯片技术更符合发展趋势。j6z中亿财经网财经门户

五、分子诊断基本流程j6z中亿财经网财经门户

多年来,大部分分子诊断实验室的核心技术都主要集中在检测特异性、相对较短的DNA或RNA片段上。该技术能诊断传染性疾病、鉴别影响药物代谢的特殊基因变异型或检测与疾病有关的基因,如与癌症有关的基因。这些检测的核心是实时定量聚合酶链反应(PCR)、转录调节扩增(TMA)、靶向扩增和信号扩增等类似技术的应用。桑格排序和DNA片段分析或采用毛细电泳法的凝胶法都是分子诊断实验室的关键技术,但他们通常还包括检测过程中的扩增步骤。为了能顺利应用那些采用DNA和RNA来诊断疾病的检测,分子诊断实验室必须要使用定义明确的工作流程,从而得到稳定的、有效的结果,而当前已存在能帮助诊断实验室实现每个工作流程流水化的特殊工具。检测的基本流程如下所示:j6z中亿财经网财经门户

1、样本收集和制备。 从样本中提取出用于检测的基因。j6z中亿财经网财经门户

2、扩增: 一旦分离出基因物质,必须立即将其扩增到可检测数量,以便做出诊断命令。j6z中亿财经网财经门户

3、检测: 获得足够的目标物质后,光型传感器将读取与即将检测的目标物质相对应的信号。信号必须是单一的或多样的,从而实现在一次反应(如多通道检测)中检测到多种目标物质。j6z中亿财经网财经门户

4、数据分析: 对在检测步骤中读取出的信号进行分析。将分析结果转换为实验室人员随时可以解释的信息,从而最终为临床医生提供诊断结果。j6z中亿财经网财经门户

六、分子诊断发展趋势j6z中亿财经网财经门户

世界各国高度重视分子诊断技术的发展,基因芯片将成为新一代分子诊断试剂开发的主流。基因芯片是分子生物学、微电子、计算机等多学科结合的结晶,综合了多种现代高精尖技术,被专家誉为"诊断行业的终极产品"。基因芯片具有同时能够检测多个靶点的功能,具有快速有效的特点。因而基因芯片成为新一代分子诊断试剂的主要开发方向,但其成本高、开发难度大,目前产品种类很少,只用于科研和药物筛选等用途。目前基因芯片的大规模临床应用还存在尚未克服的技术缺陷,主要是由于芯片诊断特异性和灵敏度低、芯片诊断成本高昂和芯片诊断配套仪器价格昂贵等原因。j6z中亿财经网财经门户

目前全球,虽然只有少数的芯片可用于临床诊断,但国内基因芯片技术已经处于世界领跑的地位。基因芯片技术将是荧光定量PCR 检测技术最具挑战的潜在对手,主要是:荧光定量PCR 技术一次只能检测一个或几个目标基因,而基因芯片技术可以实现对大量目标基因的同时检测。随着人类基因组计划的进展,基因芯片在国内外已成为研发热点。若基因芯片技术迅速成熟并大规模产业化,将对荧光定量PCR 检测产生较大的冲击。不过,目前基因芯片的大规模临床应用还存在尚未克服的技术缺陷,主要是由于芯片诊断特异性和灵敏度低、芯片诊断成本高昂和芯片诊断配套仪器价格昂贵等原因,预计荧光定量PCR 检测技术在今后5 到10 年内可保持领先。j6z中亿财经网财经门户

6. 大连夜店排名?

TT酒吧j6z中亿财经网财经门户

Tall Toys Night Club,大连人气最火爆的夜店之一,这里有闪耀的灯光系统,超豪华的舞池,颜值超高的专业MC、DJ。酒吧消费者以年轻人为主,大部分都是大连本地高校的大学生,气氛很嗨,服务很贴心。TT招牌是网红dj,比如dj宪等,是一家很适合蹦迪的酒吧。酒吧位于独立街19号远大大厦1楼,人均273元。j6z中亿财经网财经门户

奥斯卡酒吧j6z中亿财经网财经门户

Dr.oscar奥斯卡酒吧,是知名娱乐集团诺亚方舟旗下酒吧品牌,首家规模宏大的剧院式酒吧。高科技的声光电控制和别具匠心的舞台创意设计,带来颠覆性的都市夜生活体验。大连奥斯卡酒吧位于港湾街20A名仕财富1层,人均消费281元。作为剧院式酒吧典范,它以独特创新颠覆娱乐产业。自诞生以来秉承创造一流娱乐品牌的极致匠心,将“玩乐、震撼、神秘、时尚”的娱乐理念发挥到极致。j6z中亿财经网财经门户

苏荷酒吧j6z中亿财经网财经门户

苏荷酒吧是全国具原创和个性的连锁酒吧品牌,独特舒服的空间设计,极具魅力的音乐,亲切真诚的服务,构筑了苏荷独有的模式。大连苏荷酒吧位于长江路59号,人均消费173元。酒吧环境复古范,会邀请欧美乐队及歌手表演,是一家既可以欣赏演出,又可以与DJ嗨到飞起的音乐酒吧。j6z中亿财经网财经门户

PLAY HOUSE酒吧j6z中亿财经网财经门户

作为世界级夜店,PLAYHOUSE知名酒吧连锁品牌更注重演出的层次多元,品种多样,与其合作的都是在国际上都极富盛名的演艺机构。酒吧由国内顶级视觉团队设置布阵,使用世界顶级声光电硬件设备,打造后现代重工业与娱乐相结合的艺术品。酒吧位于民生街120号,人均消费180元。j6z中亿财经网财经门户

极地酒吧j6z中亿财经网财经门户

极地酒吧是大连知名老牌酒吧,没有门票和低消,是大连大学生和年轻人的交友胜地。酒吧分两层,三楼是以听歌为主的鸡尾酒小酒吧,有乐队歌手表演,四楼是国际DJ时尚音乐俱乐部,以蹦迪为主,气氛很嗨,不过周末才开放。酒吧位于大连西岗区民主广场16号,人均160元。j6z中亿财经网财经门户

艾丽丝酒吧j6z中亿财经网财经门户

大连艾丽丝俱乐部酒吧属于演艺吧模式,创立于1999年,由当初的50平方米的小酒吧发展到3000多平方米的CLUB,酒吧分三层,一楼为欧美风格的演艺酒吧,二楼、三楼为豪华KTV。艾丽丝每月都会举行一次盛大的主题派对,每晚有歌舞表演,拥有众多外籍客人,在国际上具有一定的知名度和美誉度。酒吧位于长江路51号经典生活小区B区12号楼,人均消费192元。j6z中亿财经网财经门户

VIVA Barj6z中亿财经网财经门户

VIVA Bar是大连知名清吧,提供经典鸡尾酒和单一麦芽威士忌等品类丰富的酒品,位于星海广场C3区33号君悦酒店47层,人均消费161元。酒吧可以欣赏到窗外270度无遮挡海景和霓虹闪烁的跨海大桥,并以星海湾璀璨夜景为依托,打造光影系统,引入环境融入式LED配合舞台效果,音乐由外籍资深DJ的现场演绎,使宾客可以全身心沉浸在酒吧光影环境中。j6z中亿财经网财经门户

胡桃里音乐酒馆j6z中亿财经网财经门户

胡桃里是合纵文化集团旗下连锁酒吧品牌,定位酒吧/餐厅/咖啡馆的文艺融合模式,将美食、美酒、音乐、表演融为一体,是比酒吧更具文化氛围的夜生活新地标。大连胡桃里位于长江路271号佳兆业广场北门,人均消费130元。胡桃里这个名字取自于胡桃色的暗雅而不守旧,文艺又不乏时尚的特性,设计装饰上充满了幽静与新奇,营造城市里的绿野仙踪。j6z中亿财经网财经门户

拉培耶小镇j6z中亿财经网财经门户

OX BAR 拉培耶小镇,大连知名清吧,拥有高超技艺的专业调酒师,推荐僵尸酒、椰林飘香、威士忌酸、精酿啤酒,位于友好广场昆明街27号昆明街与向前街交叉口附近,人均消费130元。酒吧是古老的英式装修风格,配有颇有年代木头桌椅,晶莹剔透的进口杯具,高级的音响设备,适合静坐小酌,是享受静谧时刻的绝佳之选。j6z中亿财经网财经门户

in lounge隐酒廊j6z中亿财经网财经门户

in lounge隐酒廊,店如其名般大隐隐于市,是一家很有特色的鸡尾酒吧。酒吧有两层,一层在热狗店里面,需要如同密室逃脱一般找到密码才能进入,当然找不到也可以按门铃,推开门就能看到琳琅满目的酒摆满了整片墙面,号称是大连最值钱的酒墙,这里鸡尾酒好喝又好看,调酒师还可以私人订制。酒吧位于吉庆街4号日航酒店后,人均消费100元。j6z中亿财经网财经门户

7. 分子分析的方法和技巧?

诊断是指应用分子生物学方法检测患者体内遗传物质的结构或表达水平的变化而做出诊断的技术。分子诊断是预测诊断的主要方法,既可以进行个体遗传病的诊断,也可以进行产前诊断。分子诊断主要是指编码与疾病相关的各种结构蛋白、酶、抗原抗体、免疫活性分子基因的检测。j6z中亿财经网财经门户

一、分子诊断的标本采集j6z中亿财经网财经门户

合理的标本采集对保证标本的完整性和核酸的定性/定量检测的准确性是至关重要的。标本应严格按照适当的生物安全指南进行采集,不合适的标本处理会导致核酸降解,产生错误的患者检测结果。j6z中亿财经网财经门户

1. 标本识别j6z中亿财经网财经门户

标本采集时应明确患者身份及其标本,充分尊重患者隐私。同时应为医疗人员提供合理而充足的检测和治疗相关的信息。标本应牢固地贴上标签,内容至少包括:识别号、采集日期和时间、标本采集者姓名、标本来源等。j6z中亿财经网财经门户

2. 申请单信息j6z中亿财经网财经门户

申请单至少包括以下几点信息:唯一标识号、入院登记号、患者姓名、出生日期、性别、种族、采集日期、标本类型、相关的临床和实验室信息、医生姓名、标本采集的部门、检测申请原因等。j6z中亿财经网财经门户

3. 标本采集j6z中亿财经网财经门户

采集人体组织或体液标本时应遵守相关的安全防范措施,佩戴手套,预防标本中血源性病原体的传播,同时阻止标本被处理人员的脱落细胞污染。特定的检测方法可能需要额外的预防措施和采集说明,如HPV检测采集宫颈标本应在醋酸试验之前。实验室采用不同的检测方法时应考虑潜在的干扰和污染来源,正确指导和培训临床医生按照特定方法或检测体系的标本采集要求进行采集。临床实验室收到标本后应尽快将标本信息输入至实验室信息系统(LIS),同时应尽快处理接收的标本。如果标本存在如溶血、冰冻血液或标记不当等情况应考虑拒收。j6z中亿财经网财经门户

4. 抗凝剂j6z中亿财经网财经门户

血液和骨髓穿刺(BMA)标本采集应使用合适的抗凝管或含其他添加剂的试管。试管添加剂的选择应根据分析物类型、试验、标本量而定,有研究表明肝素和亚铁血红素可能会抑制PCR反应。因此,推荐使用EDTA和ACD抗凝剂检测血浆或骨髓穿刺标本。如果被测量为细胞内RNA,采集血液或骨髓的设备应包含RNA稳定剂,或者在采集后立即加入RNA稳定溶液。j6z中亿财经网财经门户

5. 组织标本j6z中亿财经网财经门户

如果无法获得血液或口腔黏膜细胞(如患者死亡),或者组织标本的基因型同血液或口腔黏膜细胞不同,或者组织为某些潜在感染物质核酸的唯一来源时,可采用组织标本。通常最佳的组织量为1-2g,但由于各种组织所含的DNA和RNA的量不同,采集组织的量也因组织而异。多细胞组织如骨髓、淋巴结、脾适用于基因组DNA检测,需要的组织量较少。少细胞标本如肌肉、纤维、脂肪组织不是基因组DNA的最佳来源,采集量最好大于1-2g。通常,如果没有广泛脂肪浸润,大于10mg的组织至少获得10μg的RNA或DNA。不同组织的蛋白质的量和类型各不相同,核酸分离方法也因组织而异。按照特定来源的组织,根据厂家建议分离DNA或RNA。j6z中亿财经网财经门户

病理科医生通常从大块组织中采取有代表性的部分组织进行固定、染色、显微镜检测和病理诊断,或者选择有代表性的组织提取DNA或RNA进行分子学分析。一般选择病灶组织进行检测、非病灶组织作为对照。对照组织对某些分子检测是至关重要的,如杂合性缺失分析或微卫星不稳定性试验。j6z中亿财经网财经门户

二、分子诊断的技术种类j6z中亿财经网财经门户

分子诊断是当代医学发展的重要前沿领域之一,其核心技术是基因诊断,常规技术包括:j6z中亿财经网财经门户

(1)聚合酶链式反应(PCR);j6z中亿财经网财经门户

(2)DNA测序(DNA sequencing);j6z中亿财经网财经门户

(3)荧光原位杂交技术(FISH);j6z中亿财经网财经门户

(4)DNA印迹技术( DNA blotting );j6z中亿财经网财经门户

(5)单核苷酸多态性(SNP);j6z中亿财经网财经门户

(6)连接酶链反应(LCR);j6z中亿财经网财经门户

(7)基因芯片技术(gene chip)。j6z中亿财经网财经门户

三、分子诊断应用领域j6z中亿财经网财经门户

其中,PCR产品占据目前分子诊断的主要市场,基因芯片是分子诊断市场发展的主要趋势。PCR产品灵敏度高、特异性强、诊断窗口期短,可进行定性、定量检测,可广泛用于肝炎、性病、肺感染性疾病、优生优育、遗传病基因、肿瘤等,填补了早期免疫检测窗口期的检测空白,为早期诊断、早期治疗、安全用血提供了有效的帮助。基因芯片是分子生物学、微电子、计算机等多学科结合的结晶,综合了多种现代高精尖技术,被专家誉为诊断行业的终极产品。但其成本高、开发难度大,目前产品种类很少,只用于科研和药物筛选等用途。j6z中亿财经网财经门户

四、分子诊断基本原理j6z中亿财经网财经门户

分子诊断的主要技术有核酸分子杂交、聚合酶链反应和生物芯片技术。j6z中亿财经网财经门户

1. 核酸分子杂交技术j6z中亿财经网财经门户

具有一定互补序列和核苷酸单链在液相或固相中按碱基互补配对原则缔合成异质双链的过程,称为核酸分子杂交。杂交的双方是待测核酸序列和探针序列。应用该技术可对特定DNA或RNA序列进行定性或定量检测。j6z中亿财经网财经门户

2.聚合酶链反应(即Polymerase chain reaction,PCR)j6z中亿财经网财经门户

原理:PCR是模板DNA,引物和四种脱氧核糖核烯三磷酸(dNTP)在DNA聚合酶作用下发生酶促聚合反应,扩增出所需目的DNA。包括三个基本步骤:双链DNA模板加热变性成单链(变性);在低温下引物与单链DNA互补配对(退火);在适宜温度下TapDNA聚合酶催化引物沿着模板DNA延伸。j6z中亿财经网财经门户

3.等温扩增技术j6z中亿财经网财经门户

恒温扩增技术的基本原理和反应成分各不相同,但本质上要解决的核心难题是使新合成的DNA模板在恒定的温度下退火变性进而引发进一步的扩增反应,这使得恒温扩增技术具备检测快速、价格低廉等优势,而在及时现场检测(point of care)市场中脱颖而出。主要技术有LAMP、NEAR、RPA、ERA等。j6z中亿财经网财经门户

3.生物芯片技术是近年发展起来的分子生物学与微电子技术相结合的核酸分析检测技术。最初的生物芯片技术主要目标是用于DNA序列测定、基因表达谱鉴定和基因突变体检测和分析,所以又称为DNA芯片或基因芯片技术。由于目前这一技术已扩展至免疫反应、受体结合等非核酸领域,出现了蛋白质芯片、免疫芯片、细胞芯片、组织芯片等,所以改称生物芯片技术更符合发展趋势。j6z中亿财经网财经门户

五、分子诊断基本流程j6z中亿财经网财经门户

多年来,大部分分子诊断实验室的核心技术都主要集中在检测特异性、相对较短的DNA或RNA片段上。该技术能诊断传染性疾病、鉴别影响药物代谢的特殊基因变异型或检测与疾病有关的基因,如与癌症有关的基因。这些检测的核心是实时定量聚合酶链反应(PCR)、转录调节扩增(TMA)、靶向扩增和信号扩增等类似技术的应用。桑格排序和DNA片段分析或采用毛细电泳法的凝胶法都是分子诊断实验室的关键技术,但他们通常还包括检测过程中的扩增步骤。为了能顺利应用那些采用DNA和RNA来诊断疾病的检测,分子诊断实验室必须要使用定义明确的工作流程,从而得到稳定的、有效的结果,而当前已存在能帮助诊断实验室实现每个工作流程流水化的特殊工具。检测的基本流程如下所示:j6z中亿财经网财经门户

1、样本收集和制备。 从样本中提取出用于检测的基因。j6z中亿财经网财经门户

2、扩增: 一旦分离出基因物质,必须立即将其扩增到可检测数量,以便做出诊断命令。j6z中亿财经网财经门户

3、检测: 获得足够的目标物质后,光型传感器将读取与即将检测的目标物质相对应的信号。信号必须是单一的或多样的,从而实现在一次反应(如多通道检测)中检测到多种目标物质。j6z中亿财经网财经门户

4、数据分析: 对在检测步骤中读取出的信号进行分析。将分析结果转换为实验室人员随时可以解释的信息,从而最终为临床医生提供诊断结果。j6z中亿财经网财经门户

六、分子诊断发展趋势j6z中亿财经网财经门户

世界各国高度重视分子诊断技术的发展,基因芯片将成为新一代分子诊断试剂开发的主流。基因芯片是分子生物学、微电子、计算机等多学科结合的结晶,综合了多种现代高精尖技术,被专家誉为"诊断行业的终极产品"。基因芯片具有同时能够检测多个靶点的功能,具有快速有效的特点。因而基因芯片成为新一代分子诊断试剂的主要开发方向,但其成本高、开发难度大,目前产品种类很少,只用于科研和药物筛选等用途。目前基因芯片的大规模临床应用还存在尚未克服的技术缺陷,主要是由于芯片诊断特异性和灵敏度低、芯片诊断成本高昂和芯片诊断配套仪器价格昂贵等原因。j6z中亿财经网财经门户

目前全球,虽然只有少数的芯片可用于临床诊断,但国内基因芯片技术已经处于世界领跑的地位。基因芯片技术将是荧光定量PCR 检测技术最具挑战的潜在对手,主要是:荧光定量PCR 技术一次只能检测一个或几个目标基因,而基因芯片技术可以实现对大量目标基因的同时检测。随着人类基因组计划的进展,基因芯片在国内外已成为研发热点。若基因芯片技术迅速成熟并大规模产业化,将对荧光定量PCR 检测产生较大的冲击。不过,目前基因芯片的大规模临床应用还存在尚未克服的技术缺陷,主要是由于芯片诊断特异性和灵敏度低、芯片诊断成本高昂和芯片诊断配套仪器价格昂贵等原因,预计荧光定量PCR 检测技术在今后5 到10 年内可保持领先。j6z中亿财经网财经门户

8. 大连夜店排名?

TT酒吧j6z中亿财经网财经门户

Tall Toys Night Club,大连人气最火爆的夜店之一,这里有闪耀的灯光系统,超豪华的舞池,颜值超高的专业MC、DJ。酒吧消费者以年轻人为主,大部分都是大连本地高校的大学生,气氛很嗨,服务很贴心。TT招牌是网红dj,比如dj宪等,是一家很适合蹦迪的酒吧。酒吧位于独立街19号远大大厦1楼,人均273元。j6z中亿财经网财经门户

奥斯卡酒吧j6z中亿财经网财经门户

Dr.oscar奥斯卡酒吧,是知名娱乐集团诺亚方舟旗下酒吧品牌,首家规模宏大的剧院式酒吧。高科技的声光电控制和别具匠心的舞台创意设计,带来颠覆性的都市夜生活体验。大连奥斯卡酒吧位于港湾街20A名仕财富1层,人均消费281元。作为剧院式酒吧典范,它以独特创新颠覆娱乐产业。自诞生以来秉承创造一流娱乐品牌的极致匠心,将“玩乐、震撼、神秘、时尚”的娱乐理念发挥到极致。j6z中亿财经网财经门户

苏荷酒吧j6z中亿财经网财经门户

苏荷酒吧是全国具原创和个性的连锁酒吧品牌,独特舒服的空间设计,极具魅力的音乐,亲切真诚的服务,构筑了苏荷独有的模式。大连苏荷酒吧位于长江路59号,人均消费173元。酒吧环境复古范,会邀请欧美乐队及歌手表演,是一家既可以欣赏演出,又可以与DJ嗨到飞起的音乐酒吧。j6z中亿财经网财经门户

PLAY HOUSE酒吧j6z中亿财经网财经门户

作为世界级夜店,PLAYHOUSE知名酒吧连锁品牌更注重演出的层次多元,品种多样,与其合作的都是在国际上都极富盛名的演艺机构。酒吧由国内顶级视觉团队设置布阵,使用世界顶级声光电硬件设备,打造后现代重工业与娱乐相结合的艺术品。酒吧位于民生街120号,人均消费180元。j6z中亿财经网财经门户

极地酒吧j6z中亿财经网财经门户

极地酒吧是大连知名老牌酒吧,没有门票和低消,是大连大学生和年轻人的交友胜地。酒吧分两层,三楼是以听歌为主的鸡尾酒小酒吧,有乐队歌手表演,四楼是国际DJ时尚音乐俱乐部,以蹦迪为主,气氛很嗨,不过周末才开放。酒吧位于大连西岗区民主广场16号,人均160元。j6z中亿财经网财经门户

艾丽丝酒吧j6z中亿财经网财经门户

大连艾丽丝俱乐部酒吧属于演艺吧模式,创立于1999年,由当初的50平方米的小酒吧发展到3000多平方米的CLUB,酒吧分三层,一楼为欧美风格的演艺酒吧,二楼、三楼为豪华KTV。艾丽丝每月都会举行一次盛大的主题派对,每晚有歌舞表演,拥有众多外籍客人,在国际上具有一定的知名度和美誉度。酒吧位于长江路51号经典生活小区B区12号楼,人均消费192元。j6z中亿财经网财经门户

VIVA Barj6z中亿财经网财经门户

VIVA Bar是大连知名清吧,提供经典鸡尾酒和单一麦芽威士忌等品类丰富的酒品,位于星海广场C3区33号君悦酒店47层,人均消费161元。酒吧可以欣赏到窗外270度无遮挡海景和霓虹闪烁的跨海大桥,并以星海湾璀璨夜景为依托,打造光影系统,引入环境融入式LED配合舞台效果,音乐由外籍资深DJ的现场演绎,使宾客可以全身心沉浸在酒吧光影环境中。j6z中亿财经网财经门户

胡桃里音乐酒馆j6z中亿财经网财经门户

胡桃里是合纵文化集团旗下连锁酒吧品牌,定位酒吧/餐厅/咖啡馆的文艺融合模式,将美食、美酒、音乐、表演融为一体,是比酒吧更具文化氛围的夜生活新地标。大连胡桃里位于长江路271号佳兆业广场北门,人均消费130元。胡桃里这个名字取自于胡桃色的暗雅而不守旧,文艺又不乏时尚的特性,设计装饰上充满了幽静与新奇,营造城市里的绿野仙踪。j6z中亿财经网财经门户

拉培耶小镇j6z中亿财经网财经门户

OX BAR 拉培耶小镇,大连知名清吧,拥有高超技艺的专业调酒师,推荐僵尸酒、椰林飘香、威士忌酸、精酿啤酒,位于友好广场昆明街27号昆明街与向前街交叉口附近,人均消费130元。酒吧是古老的英式装修风格,配有颇有年代木头桌椅,晶莹剔透的进口杯具,高级的音响设备,适合静坐小酌,是享受静谧时刻的绝佳之选。j6z中亿财经网财经门户

in lounge隐酒廊j6z中亿财经网财经门户

in lounge隐酒廊,店如其名般大隐隐于市,是一家很有特色的鸡尾酒吧。酒吧有两层,一层在热狗店里面,需要如同密室逃脱一般找到密码才能进入,当然找不到也可以按门铃,推开门就能看到琳琅满目的酒摆满了整片墙面,号称是大连最值钱的酒墙,这里鸡尾酒好喝又好看,调酒师还可以私人订制。酒吧位于吉庆街4号日航酒店后,人均消费100元。j6z中亿财经网财经门户